人工老化水稻种子生理生化变化、DNA损伤及活力恢复的研究的中期报告.docx

  葡聚糖内切酶在转基因水稻种子中的表达及水稻种子中重组人血清白蛋白的纯化的开题报告

  内容提示：-125-2021年 第10期试验研究水稻种子生理生化指标及相关酶基因表达与活力变化关系何玲玲（贵州省黔南布依族苗族自治州三都县农业农村局，贵州黔南 558100）摘 要：水稻种子在实际进行贮藏的过程中，自身的活力相对较多，为了更加透彻的掌握研究要点，选择性观察发芽及田间出苗情况做分析，主要通过发芽试验进行，并确定有无生命力的水稻品种，掌握可溶性糖和可溶性蛋白质在种子发芽过程中发挥的作用，探讨不同基因型水稻种子在萌发过程中主要呈现的基因表达差异，分析酶，活性与种，子活力与，基因表达，之间的关系。关键词：水稻种子；相关酶基因表达；活力变化1 研究背景种子发芽本质上...

  -125-2021年 第10期试验研究水稻种子生理生化指标及相关酶基因表达与活力变化关系何玲玲（贵州省黔南布依族苗族自治州三都县农业农村局，贵州黔南 558100）摘 要：水稻种子在实际进行贮藏的过程中，自身的活力相对较多，为了更加透彻的掌握研究要点，选择性观察发芽及田间出苗情况做多元化的分析，主要是通过发芽试验进行，并确定有无生命力的水稻品种，掌握可溶性糖和可溶性蛋白质在种子发芽过程中发挥的作用，探讨不同基因型水稻种子在萌发过程中主要呈现的基因表达差异，分析酶，活性与种，子活力与，基因表达，之间的关系。关键词：水稻种子；相关酶基因表达；活力变化1 研究背景种子发芽本质上是未成熟胚恢复活跃生长状态的生命活动过程。从生理学的角度来看，在发芽过程中未休息或中断休息期的种子的呼吸作用在吸水后增加，并从相对静态变为生理活性状态。储存的物质被分解并转化为胚胎的营养物质，从而促进胚胎的生长的处理。从形态学的角度来看，在发芽过程中，有活力的种子吸收了水分后，胚胎会突破种皮并成长为正常的幼苗。从分子生物学的角度来看，发芽的本质是诸如温度，湿度和光照等因素促进种子中酶的活化和相关基因的表达，并产生与胚胎生长相关的一系列反应。2 材料与方法本研究在实际开展的过程中，不仅在理论基础上做多元化的分析，同时通过田间试验的方式进行，品种有：昌4738，山农20，石岛21，豫农949，河南农982，六宣061，塘岛8，济道20，玉岛49~198，山农23，绿园502，济道22，济南17，郑玉岛9987，世新828，徐农5号。对活力和旋转力低的061进行了酶活性评估，并检测了可溶性糖，并测定可溶性蛋白含量和基因表达。2.1 种子活力测定均匀种植16个水稻品种的种子，每个品种有100颗种子，将其重复四次并在20℃的沙床培养箱中生长。在将种子置于床上后的第四天，检查并计算发芽势，然后根据第八天。将正常幼苗在105℃淬灭30min并在80℃干燥至恒重后，称量幼苗和根的干重。计算公式为：发芽势％=4d正常幼苗/试验种子X100％；发芽率％=8d正常幼苗/被测种子X100％；发芽指数=ZGt/Dt，其中Gt是时间 [1] 。t处的发芽数，Dt是相应的发芽天数；力指数=GIW，其中S是单苗的干重（g）这就是控件。2.2 生理生化指标测定使用清水作为用于控制，冷浴和人工老化的溶胀溶液在黑暗中进行多次处理将培养箱在20℃下培养，从种子中取样以使其溶胀并在0h，6h，12h，24h，36h，48h，60h，72h后发芽。试验测得1mg/mL的牛血清蛋白，并且应该在现有的基础上准确称取100mg牛血清蛋白，随后通过蒸馏水的运用，有效的将牛血清蛋白溶解，取100mL，摇匀，并且应该遵循试验配置要求。与此同时，为了能够保证试验数据的准确性，在选择性测得的过程中应该取7支干净试管，并分别为每个试管进行编号，适当的对各项工作进行优化，确保通过对比分析掌握牛血清蛋白含量，并通过吸光度的分析，绘制符合实验项目的标准曲线，通过方程及多种方式进行优化，保证实验开展的高效性。3 结果分析3.1 不同逆境对水稻种子萌发过程中淀粉酶基因表达的影响针对水稻品种相关酶基因表达的差异检测工作开展来讲，为了能够通过各项实验完成，则应该注重做好更为全面的分析，并通过逆境萌发的检测模式，对冷浸胁迫后，Roxuan061a-AMY的表达为何高于对照组展开分析。通过总结，针对不同逆境的影响，由于存在一定的差异，所以在检测工作开展的过程中，应该对发芽情况了解更为充分，全面发挥各项工作开展的效果，并适当的进行优化与创新 [2] 。其中在标准发芽条件下，由于发芽时间在不断延长，而且每种品种的-AMY基因表达先升高后降低，针对这种情况的出现，为了能够更加全面的将影响因素解决，则应该注重做好相对较为全面的分析，这样有助于优化与调整，并通过不同处理方法的运用发挥不同菌株具有其自身的特征。3.2 不同逆境对水稻种子萌发过程中蛋白酶基因表达的影响在不同逆境下对水稻种子萌发过程中蛋白酶基因表达做多元化的分析的过程中，为了可以更加全面掌握其产生的主要影响，必须要事先做好相对较为全面的分析，并通过多种形式掌握实验过程中面临的问题，这样有助于为日后优化工作提供更多帮助。其中在通过人工老化处理后，Chang4738的CP基因表达与对照无明显差异 [3] 。而且对于分析不同发芽条件下产生的影响，应该在现有的基础上做好相对较为全面的分析，确保可以适当的来优化，并制定针对性优化分析方案，掌握不同水稻品种在不同逆境下所表现的能力、水稻品种的生长趋势，为进一步开展试验探究提供更多帮助。4 结束语水稻种子萌发过程中应该注重检测相关酶活性的情况，这样有助于更加全面掌握贮藏物质含量及其变化情况。再则针对标准发芽、人工老化逆境发芽等条件测试水稻生长情况来讲，需要通过发芽时间的控制，分析淀粉酶活性的发展趋势，从而能够在现有的基础上来优化与完善，避免受到较多的因素影响及限制。除此之外，对于水稻种子生理生化指标的研究工作来讲，要想更充分的掌握相关酶基因表达及活力之间的关系，在开展实验探究的过程中，必须要对实验形式进行创新，并全面掌握各项工作测试过程所面临的问题，完善各项标准，最大化发挥处理的高效性。参考文献[1] 白永富，卢秀萍，肖炳光，等.烟草种子萌发期间淀粉酶活性与可溶性总糖的相关性研究[J].种子，2006（9）：27-29.[2] 白志英，李存东，孙红春，等.小麦代换系抗旱生理指标的主成分分析及综合评价[J].中国农业科学，2008，41（12）：4264-4272.[3] 程春明，王瑞珍，吴问胜.大豆种子活力基因型差异的研究[J].江西农业学报，2003（1）：8-12.作者简介：何玲玲（1978），女，研究方向：农业技术推广。万方数据